【导语】下面小编给大家带来大鼠高亲和力二羧酸转运蛋白的克隆表达及细胞内定位（共2篇），希望能帮助到大家!
篇1：大鼠高亲和力二羧酸转运蛋白的克隆表达及细胞内定位
大鼠高亲和力二羧酸转运蛋白的克隆表达及细胞内定位
目的:克隆大鼠高亲和力钠依赖二羧酸转运蛋白(SDCT2)的.全长cDNA,并明确其在肾小管上皮细胞内的定位表达情况.方法:从大鼠肾组织中提取总RNA,用带有8肽FLAG标签的PCR引物通过RT-PCR技术扩增出SDCT2全长基因并测序,将其插入真核表达载体中构建SDCT2真核表达载体,然后将它们转染到肾小管上皮细胞LLC-PK1中表达,并用激光共聚焦显微镜观察该蛋白的亚细胞定位情况.结果:扩增出2 kb的SDCT2全长基因,Westem blot表明SDCT2基因在LLC-PK1细胞中得到了正确的表达;共聚焦显微镜分析显示正常SDCT2蛋白主要定位于细胞膜上,与生物信息学的预测结果一致;为了比较不同连接温度对重组DNA连接效率的影响,观察了3种连接温度下的转化效率,结果显示温度循环法的连接效率明显比其他2种常规连接温度要高.结论:高亲和力钠依赖二羧酸转运蛋白全长基因被成功克隆,其主要表达于肾小管上皮细胞膜上.
作 者：侯剀 白雪源 陈香美 冯哲 傅博 HOU Kai BAI Xue-Yuan CHEN Xiang-Mei FENG Zhe FU Bo 作者单位：解放军总医院/军医进修学院,全军肾脏病研究所,北京,100853 刊 名：生物技术通讯 ISTIC英文刊名：LETTERS IN BIOTECHNOLOGY 年，卷(期)： 19(3) 分类号：Q78 Q735 关键词：二羧酸转运蛋白 三羧酸循环 肾小管 亚细胞定位 连接效率篇2：一个新的水稻液泡膜Na+/H+逆向转运蛋白基因的克隆及表达特征
一个新的水稻液泡膜Na+/H+逆向转运蛋白基因的克隆及表达特征
通过RT-PCR技术从水稻幼苗组织中克隆了一个新的Na+/H+逆向转运蛋白基因OsNHX2,它编码一条长544氨基酸的多肽.OsNHX2与水稻和拟南芥的液泡膜Na+/H+逆向转运蛋白OsNHX1、AtNHX1氨基酸序列一致性分别为78%和77%.基因结构分析表明OsNHX2与OsNHX1具有类似的外显子和内含子构成,但不同于拟南芥AtNHX1,表明OsNHX2与OsNHX1可能起源于单双子叶植物分化后的水稻染色体复制.半定量RT-PCR方法检测了OsNHX2与OsNHX1在水稻耐盐品种韭菜青与盐敏感品种IR28的地上部与根部的表达.结果表明:耐盐品种韭菜青的OsNHX2与OsNHX1基因在盐胁迫下表达持续增强,而在盐敏感品种IR28的地上部,OsNHX2基因在盐胁迫处理后1 h表达增强后立即减弱,根部的表达则基本不变,而IR28地上部与根部OsNHX1则在盐胁迫处理初期表达增强,随后即减弱.研究结果表明水稻两个液泡膜Na+/H+逆向转运蛋白基因OsNHX2、OsNHX1在盐敏感程度不同的水稻品种中表达有所不同,液泡膜Na+/H+逆向转运蛋白基因的'转录调控可能是决定水稻耐盐能力的一个重要因素.
作 者：邱生平周国安 陆驹飞 黄骥 潘丽娟 王建飞 杨清 张红生 QIU Sheng-ping ZHOU Guo-an LU Ju-fei HUANG Ji PAN Li-juan WANG Jian-fei YANG Qing ZHANG Hong-sheng 作者单位：邱生平,黄骥,潘丽娟,王建飞,张红生,QIU Sheng-ping,HUANG Ji,PAN Li-juan,WANG Jian-fei,ZHANG Hong-sheng(南京农业大学,作物遗传与种质创新国家重点实验室,江苏,南京,210095)周国安,杨清,ZHOU Guo-an,YANG Qing(南京农业大学,生命科学学院,江苏,南京,210095)
陆驹飞,LU Ju-fei(扬州大学,农学院,江苏,扬州,225009)
刊 名：中国水稻科学 ISTIC PKU英文刊名：CHINESE JOURNAL OF RICE SCIENCE 年，卷(期)：2006 20(2) 分类号：Q943.2 Q945.78 关键词：水稻 盐胁迫 液泡膜Na+/H+逆向转运蛋白基因 基因克隆 表达特性
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