以下是小编为大家收集的不同制法马钱子抗炎镇痛作用讨论论文，本文共6篇，欢迎参阅，希望可以帮助到有需要的朋友。
篇1：不同制法马钱子抗炎镇痛作用讨论论文
不同制法马钱子抗炎镇痛作用讨论论文
炎症是机体对炎症因子的损伤产生的一种以血管渗透为中心的积极防御反应，是机体对损伤性刺激的保护性反应，该过程会产生如组胺、前列腺素等致痛物质，加重机体的疼痛与损伤。多年研究早已证实中药制剂具有很好的抗炎镇痛作用，且毒副作用小。马红丸是广州市中医医院自上世纪70年代初就应用于治疗肝癌的特色中药制剂。前期课题组采用反相高效液相色谱法测定了马红丸君药马钱子活性成分马钱子碱的含量，并对马钱子碱脂质体不同给药方式进行了药动学考察。本实验采用小鼠耳廓肿胀法、醋酸扭体法与小鼠热水甩尾法对不同制法马钱子的抗炎镇痛作用进行比较，为马钱子的减毒增效炮制工艺优化提供理论依据。
1 材料
1. 1 药材
生马钱子购于广州采芝林药业有限公司，批号: YPA0J0001，经广东省生物制品与药物研究所钟世顺副主任药师鉴定为马钱科植物马钱Strychnos nux-vomica L. 的干燥成熟种子。1. 2 动物
SPF 级健康昆明小鼠264 只，雌雄各半，体重18 ～ 22 g，由广东省医学实验动物中心提供，实验动物生产许可证号: SCXK( 粤) -0002。
1. 3 试剂
阿司匹林肠溶片，河南天地药业股份有限公司，批号: 140405; 乙醚和二甲苯，天津市富宇精细化工有限公司，批号分别为1205 和0210; 醋酸，天津市大茂化学试剂厂，批号:20140520; 食用油、白醋，广州顶益食品有限责任公司; 粗河沙适量。
1. 4 仪器
AEL-160 型电子分析天平( 日本岛津公司) ; 恒温水浴锅( 上海齐欣科学仪器有限公司) 。
2 方法
2. 1 实验用药的制备
2. 1. 1 马钱子药材的净制:
将马钱子置于草木灰的余火中不停翻动，烤至表面鼓起，取出，刮去茸毛，得马钱子生品。
2. 1. 2 油马钱子的制备:
市售麻油倒入铁锅中用温程400 ℃温度计距锅底3 mm 处测温，待温度至235 ℃时投入生马钱子，炸至老黄色为度，取出沥尽油，晾冷。
2. 1. 3 砂马钱子的制备:
取洁净粗河沙加入锅内加热，用温程300 ℃温度计距锅底3 mm 测温，待温度至230 ℃时投入生马钱子，掩埋30 s，不断翻动3min，至鼓起爆裂并显棕褐色或深棕色时迅速出锅，晾凉。
2. 1. 4 醋马钱子的制备:
取生马钱子水浸2 d，润12 h，作切片前的软化处理，切成1. 5 mm 厚的薄片。每100 g 马钱子加入20 mL 醋拌匀，待醋吸净后即炒干，取出晾凉。
2. 1. 5 马钱子水煎液的.制备:
称取马钱子油炙品、砂制品和醋制品粗颗粒各50 g，分别用蒸馏水浸泡30 min，煎煮至沸后用文火煮30 min，搅拌，滤出煎液，药渣再用适量蒸馏水煎煮20 min，滤出煎液，合并滤液，浓缩至生药含量高剂量20 mg /kg，中剂量10 mg /kg，低剂量5 mg /kg。
2. 2 实验方法
2. 2. 1 耳廓肿胀法:
取小鼠88 只，雌雄各半，随机分为模型组( 生理盐水组) ，阿司匹林组( 20 mg /kg) ，油马钱子高、中、低剂量组，砂马钱子高、中、低剂量组，醋马钱子高、中、低剂量组，每组8 只，分别灌胃给药，连续给药2 w。于末次给药后1 h，用乙醚轻度麻醉，在小鼠右耳两侧涂20 μL 二甲苯致炎，左耳不作任何处理，3h 后将小鼠脱颈椎处死，剪下两耳，用直径7 mm 的打孔器在对应位置冲下左右耳廓，分别在电子天平称重，计算肿胀度。肿胀度= 致炎耳片重- 非致炎耳片重。
2. 2. 2 扭体法:
取小鼠88 只，分组及给药同“2. 2. 1”项下，各组小鼠在末次给药后30 min 腹腔注射0. 5%的醋酸溶液20 mL /kg，观察并记录注射醋酸溶液后15 min 内出现扭体反应次数，实验完毕后，计算药物镇痛百分率。镇痛率=对照组扭体次数- 给药组扭体次数对照组扭体次数× 100%。
2. 2. 3 甩尾法: 取小鼠88 只，按“2. 2. 1”项下方法分组。小鼠禁食不禁水12 h，将小鼠尾端0. 5 cm 浸入57 ℃恒温水浴锅中，记录鼠尾进入水面到回缩出水面的时间为甩尾潜伏期。各组小鼠用药前测痛2次，每次间隔10 min，取平均值作为基础痛阈值( 剔除小于1 s 及大于6 s 的个体) 。24 h 后取合格小鼠测定基础潜伏期，然后按“2. 2. 1”项下方法分别灌胃给药，测定并记录各给药组末次给药后30、60、90、120 min 小鼠甩尾潜伏期变化。
2. 3 数据处理
用SPSS 17. 0 软件进行统计分析，组间数据比较采用单因素方差分析( One-way ANOVA)，以P < 0. 05 表示差异有统计学意义，所得数据以珋x ± s 表示。
3 结果
3. 1 对二甲苯致小鼠耳廓肿胀的影响
除油马钱子和砂马钱子低剂量组外，其余各组给药2 w 后对二甲苯所致的小鼠耳廓肿胀均有不同程度的抑制作用，其中醋马钱子中、高剂量作用最强。
3. 2 对醋酸腹腔刺激致小鼠扭体的影响
各组均对醋酸腹腔刺激所致的疼痛有显著的抑制作用，尤以醋马钱子高剂量组的镇痛作用最强，镇痛率为46. 2%。
3. 3 对小鼠热水甩尾潜伏期的影响除油马钱子低剂量组外，各组多能显著延长小鼠甩尾潜伏期。与模型组比较，除油马钱子及砂马钱子低剂量组外，其余各组马钱子制品不同剂量组在30 min 后均能延长小鼠甩尾潜伏期，而醋制马钱子对其影响最大。
4 讨论
马钱子因大毒、安全范围小，限制了临床应用，其中马钱子碱和番木鳖碱可作用于脊髓，兴奋脊髓的反射功能，引起感觉器官敏感，调节大脑皮层兴奋和抑制过程，提高横纹肌、平滑肌和心肌的张力，导致强直性惊厥，最后因呼吸麻痹而致死。适当的炮制方式可迅速破坏马钱子相关有毒物质结构，使其转化成药理作用相似但毒性降低的氮氧化物和异型生物碱。而含毒性马钱子的中成药制剂数量较少，且多为炮制后入丸散用。
篇2：谈乳络通胶囊的镇痛抗炎及改善微循环作用的论文
谈乳络通胶囊的镇痛抗炎及改善微循环作用的论文
中医认为乳腺增生主要为肝郁气滞，痰瘀瘟结于经络，从而形成“ 乳癖” ，相当于现代医学的乳房纤维性瘤，乳腺囊性，临床症状主要为乳房出现肿块，疼痛等。乳络通主要有香附、丹参、柴胡、白芍、栝楼、路路通6 味药组成，本文采用急慢性炎症动物模型和疼痛模型评价了乳络通的抗炎、镇痛及改善微循环作用，旨在为其治疗乳腺增生提供药效学依据。
1 材料和方法
1. 1 试验药物乳络通胶囊( 乳络通) ，由河南中医学院第一附属医院制剂室提供，批号050901，规格: 0. 2g /粒，用量: 每次3～ 4 粒，每天3 次。乳康片，由安康正大制药有限公司提供，批号: 0518，规格: 0. 35g × 24 片，用量: 一次3 片，一日3 次。
1. 2 动物大鼠，Wistar，雌性，清洁级，由河南省实验动物中心提供，合格证号: 0001640。小鼠，昆明种，雌性，清洁级，由河北省实验动物中心提供，合格证号: DK0509096。
1. 3 试剂硫化钠，由天津市科密欧化学试剂开发中心提供，批号: 021-16，规格: 500g。
1. 4 仪器BZ- 微循环观察系统，由成都泰盟电子有限公司提供。FA( N) /JA( N) 系列电子天平，由上海民桥精密仪器有限公司提供。YLS-6A 智能热板仪，由山东省医学科学院设备站提供。
1. 5 方法
1. 5. 1 乳络通对热板法致痛小鼠的影响取18 ～ 20g 的清洁级昆明种雌性小鼠，用智能热板仪( 56℃) 测定它们的初始痛阈值，以小鼠舔后足跖为痛阈出现的指标，进行小鼠筛选标记。再取痛阈值在5 ～ 20S 的合格小鼠50 只，随机分为5 组。分别灌胃高、中、低剂量的乳络通混悬液( 0. 60g /kg、0. 30g /kg、0. 15g /kg) 、乳康片混悬液( 0. 53g /kg) ，及同体积的生理盐水。每天灌胃1 次，连续灌胃3 天，于最后一次灌胃30min 后，在同样环境中分别测定它们30min， 60min， 90min， 120min 的痛阈值。
1. 5. 2 乳络通对二甲苯致小鼠耳廓肿胀的影响取20 ～ 22g的清洁级昆明种雌性小鼠50 只，随机分为5 组，分别灌胃乳康片( 0. 53g /kg) ，乳络通高、中、低( 0. 60g /kg、0. 30g /kg、0. 15g /kg) 剂量和同体积的生理盐水。每天灌胃1 次，连续给药3 天，于最后一次灌药1h 后，每鼠左耳滴二甲苯0. 04ml( 正反均滴) ，右耳作为对照，滴加二甲苯1h 后处死动物，取下双耳，对齐，用0. 8cm 的打孔器打下双耳耳片。迅速在分析天平上称重，测肿胀度( 左耳与右耳的质量差) 。
1. 5. 3 乳络通对大鼠棉球肉芽肿的影响取130 ～ 150g 清洁级Wistar 雌性大鼠50 只，随机分为乳络通高、中、低剂量( 0.60g /kg、0. 30g /kg、0. 15g /kg) 组，乳康片组( 0. 53g /kg) 和空白对照组( 灌同体积的生理盐水) 。实验前禁食不禁水10h。取脱脂棉( 20 ± 0. 5 mg) 60 个，分别称重，放入高压灭菌锅内灭菌1h，90℃烘箱干燥3h。干燥后再次称重并记录重量，放入干燥器内备用。麻醉大鼠，在无菌操作下埋入后大腿内侧腋窝皮下。每天灌胃1 次，连续灌胃7 天，最后一次给药1h 后，处死动物，剥离棉球肉芽肿。取出后60℃ 烘干24h，称重，计算肉芽肿的重量。
1. 5. 4 乳络通对小鼠耳廓微循环的影响取18 ～ 22g 的清洁级昆明种雌性小鼠50 只，随机分为乳络通高、中、低组( 0. 60g /kg、0. 30g /kg、0. 15g /kg) ，乳康片组( 0. 53g /kg) 和空白对照组( 灌同体积的生理盐水) 。每天灌胃给药1 次，连续灌胃5 天。实验前每鼠右耳用8% 硫化钠脱毛，再用温水洗净， 24h 后进行实验。末次给药30min 后，水合氯醛( 3% 0. 15m1 /10g) 腹腔注射麻醉。将小鼠固定在观察台上( 耳托上和耳廓表面滴加少许液体石蜡) ，用BZ-2000 型微循环显微镜和微循环测量分析系统观察小鼠耳廓微循环情况。用微量注射器腹腔注射用生理盐水稀释( 1: 9) 的盐酸肾上腺素注射液( 0. 6mg /kg) ，记录注射前和注射后5、10、20min 小鼠微循环细静脉、细动脉的管径和血流速度变化情况。
2 结果
2. 1 乳络通对热板法致痛小鼠的影响知: 30min 时，乳康片组、高、中、低剂量乳络通组的小鼠痛阈值提高较大，与空白对照组比较差别明显。60min时，乳康片组、高、中、低剂量乳络通组的小鼠痛阈提高值较大，与空白对照组比较差别显著。90min 时，乳康片组、高、中、低剂量乳络通组的小鼠痛阈值提高较大，与空白对照组比较差别显著。120min 时，高、中剂量乳络通组的小鼠痛阈值提高较大，与空白对照组比较差别明显。
2. 2 乳络通对二甲苯致小鼠耳廓肿胀的影响由表2 可知: 乳康片组，高、中剂量乳络通组对小鼠耳廓肿胀有显著地抑制作用，低剂量乳络通组对小鼠耳廓肿胀有明显地抑制作用，与空白组比较，有明显差异。
2. 3 乳络通对大鼠棉球肉芽肿的影响由表3 可知: 乳康片、高、中剂量乳络通组对大鼠棉球肉芽肿有显著的抑制作用，低剂量乳络通组对大鼠棉球肉芽肿有明显地抑制作用，与空白对照组比较，有明显差异。
2. 4 乳络通对小鼠耳廓微循环的影响从表4 可知: 在5min 时，高、中剂量乳络通组的小鼠耳廓微循环细静脉管径收缩较小，与空白对照组比较，差别明显。而乳康片组和低剂量乳络通组的小鼠耳廓微循环细静脉管径收缩较大，与空白对照组比较，无显著差别。在10min 时，乳康片组、高、中剂量乳络通组的小鼠耳廓微循环细静脉管径收缩较小，与空白对照组比较差别显著; 而低剂量乳络通组的小鼠耳廓微循环细静脉管径收缩明显，与空白对照组比较无显著差别。在20min 时，乳康片组、高、中剂量乳络通组的耳廓微循环细静脉管径收缩较小，与空白对照组比较差别显著( P < 0. 01) ; 而低剂量乳络通组的小鼠耳廓微循环细静脉管径收缩明显，与空白对照组比较无显著性差别。从表5 可知: 5min 时，各组小鼠耳廓微循环细动脉管径稍有收缩，无差异。在10min 时，乳康片组、高、中、低剂量乳络通组的'小鼠耳廓微循环细动脉管径收缩较小，与空白对照组比较差别显著。在20min 时，乳康片组、高、中、低剂量乳络通组的小鼠耳廓微循环细动脉管径收缩较小，与空白对照组比较差别显著。
与空白组比较，在5min 时，各组小鼠耳廓微循环血流速度有所减小，但无差别。在10min 时，乳康片组、高、中剂量乳络通组的小鼠耳廓微循环血流速度减少值较小，与空白对照比较，差别显著。在20min 时，乳康片组、高、中、低剂量乳络通组的小鼠耳廓微循环血流速度减少值较小，与空白对照组比较，差别显著。
3 讨论
乳腺增生病是严重危害女性健康的一种常见疾病、多发病。中医认为该病主要由情志不畅，思虑过度，导致肝失舒泄，气机不畅，气滞血瘀，或肝脾不和，痰气凝滞而成。现代医学认为乳腺增生是由性激素代谢紊乱，卵巢内分泌功能失调，雌激素相对或绝对过高而引起，其临床特征为乳房胀痛、乳房肿块，一般常于月经前期加重，行经后减轻。对于该病的治疗，中医治疗原则是以疏肝解郁，理气止痛，软坚散结为主。
乳络通主要有香附、丹参、柴胡、白芍、栝楼、路路通六味药组成，具有理气化淤、软坚散结、消肿止痛的功效，在前期的研究中，我们复制了大、小鼠乳腺增生模型，观察了其对乳腺增生的治疗作用及其作用机制。为了更进一步验证该药的药效，我们观察其活血散瘀，消肿止痛的作用。
在本实验中，我们采用热板法、二甲苯致小鼠耳廓肿胀法、大鼠棉球肉芽肿法及小鼠耳廓微循环法来观察乳络通的镇痛、抗炎及改善微循环的作用。结果显示乳络通能提高小鼠痛阈值，减轻耳廓肿胀的程度，使大鼠棉球肉芽肿的重量减小，能对抗肾上腺素引起的微血管收缩，能扩张小鼠耳廓微动脉、微静脉管径，改善血液流态。通过本实验的研究，乳络通具有一定的镇痛和抗炎作用。
篇3：岗梅水提取物抗炎作用的实验研究论文
岗梅水提取物抗炎作用的实验研究论文
目的 研究岗梅水提取物的抗炎作用。方法 采用二甲苯致小鼠耳廓肿胀法、角叉菜胶致大鼠足跖肿胀法、大鼠棉球肉芽肿法和醋酸致小鼠毛细血管通透性增高法观察岗梅水提取物的抗炎作用。结果 岗梅水提取物能明显抑制二甲苯所致的小鼠耳廓肿胀和角叉菜胶所致的大鼠足跖肿胀及炎性组织中PGE2的生成，减少大鼠棉球肉芽肿的形成，同时对醋酸所致小鼠毛细血管通透性增高具有显著抑制作用。 结论 岗梅水提取物具有明显抗炎作用。Abstract:Objective To study the anti-inflammatory activity of the water extract from Radix et Caulis Ilicis Asprellae. Methods The models of xylene-induced ear edema in mice, hind paw edema induced with carrageen in rats, granuloma induced with cotton ball in rats, and capillary permeability increase induced with acetic acid in mice were used to observe the anti-inflammatory effects. Results The water extract from Radix et Caulis Ilicis Asprellae could inhibit xylene-induced ear edema and capillary permeability increase in mice, hind paw edema and PGE2 increase induced with carrageen and granuloma induced with cotton ball in rats. Conclusion The water extract from Radix et Caulis Ilicis Asprellae has significant anti-inflammatory effects.
Key words:Radix et Caulis Ilicis Asprellae；water extract；anti?inflammatory；mice
岗梅是冬青科植物梅叶冬青Ilex asprella(Hook .et Arm.) champ. ex Benth.的干燥根及茎。其味苦、微甘、性凉。有清热解毒、生津止渴、利咽消肿、散瘀止痛之功， 常用于感冒发热、肺热咳嗽、热病津伤口渴等［1］ 。岗梅主产于两广地区（广东、广西），是多种凉茶中的主要药味，应用较广。但目前尚未见有关岗梅水提取物抗炎作用的系统报道，笔者对岗梅水提取物进行抗炎作用的动物实验研究，报告如下。
1 材料与方法
1.1 药物及试剂 岗梅水提取物采用水煎法自制，方法为：取适量岗梅，每次用8倍量水煎煮1 h，共2次，合并2次水煎煮液，浓缩，备用；阿司匹林片：河北石家庄制药集团生产，批号：041114；乌拉坦：国药集团化学试剂有限公司生产，批号：E60521；二甲苯：广东光华化学厂有限公司生产，批号：20050218；角叉菜胶购自美国Sigma公司， 批号：59C-0328；青霉素和链霉素混合液（每毫升含800 U青霉素和650 U链霉素）。
1.2 动物 昆明种小鼠，雄性，体质量20～24 g，SPF级，由第一军医大学实验动物中心提供，动物合格证号：A063号；SD大鼠，雄性，体质量150～180 g，清洁级标准，由中山大学实验动物中心提供，动物合格证号：粤检证字2003A070。
1.3 仪器 大鼠足跖容积测定装置，参照文献［2］方法定制。
1.4 方法
1.4.1 对二甲苯致小鼠耳廓肿胀的影响［2］取昆明种小鼠60只，随机分为正常对照组、模型对照组、岗梅水提取物低、中、高剂量组、阳性对照药物（阿司匹林）组，共6组，每组10只，实验前小鼠禁食不禁水12 h，然后各组小鼠按0.1 mL/10 g体质量灌胃给药，1次/d，共7 d，其中正常对照组和模型对照组给等体积蒸馏水。末次给药后30 min，除正常对照组外，其余各组小鼠于右耳正反两面涂上二甲苯50 μL致炎，致炎1 h后脱颈椎处死动物，用直径9 mm打孔器冲下左耳和右耳同一部位的圆片，于分析天平上称重，以两耳片重差值为炎症肿胀度。
篇4：不同产地血竭凝血和抗血小板聚集作用的比较论文
不同产地血竭凝血和抗血小板聚集作用的比较论文
目的 考察不同产地血竭在凝血和抗血小板聚集方面的作用。方法 采用毛细血管法测定凝血时间，体内血小板致聚剂——胶原和肾上腺素诱导小鼠血瘀模型。结果 不同产地血竭对正常小鼠的凝血功能均有一定的抑制作用，可较明显抑制小鼠对血小板致聚剂诱发的血小板聚集作用。结论 国产血竭和进口血竭均有一定的活血化瘀和抗血栓形成的作用。Abstract:Objective To assess the activity in blood clotting and antiplatelet aggregation of dragon blood from different habitats．Methods Capillary method was used to get clotting time and congestive mice model induced with collagen protein and epinephrine hydrochloride was used．Results Dragon blood from different habitats have some inhibitory actions on blood clotting of healthy Kunming mice，platelet aggregation induced by platelet activation was also inhibited obviously．Conclusion Dragon bloods from China and abroad have some effects on promoting blood circulation，removing blood stasis and anti-thrombosis．
Key words:Dragon blood；clotting time(CT)；platelet aggregation
血竭（dragon blood）是珍贵的中药传统品种之一，主要来源于棕榈科麒麟竭及百合龙血树属龙血竭，进口的血竭主要为棕榈科麒麟血竭。国产龙血竭与进口棕榈科的血竭相比，在化学成分上有较大差异，国产血竭对血液系统、心血管系统有较强的药理作用［1-3］ 。本研究的目的是以凝血时间和抗血小板聚集反应为指标，比较不同产地血竭凝血和抗血小板聚集作用，为进一步研究国产血竭替代进口血竭在血液方面的作用机制提供理论依据。
1 实验材料
1.1 药品与试剂 广西、云南、印尼、龙王、柬龙5种产地血竭原料，购于市场，由广东药学院药科学院天然药物化学教研室吕华冲副教授鉴定，自处理：用95%乙醇索式提取，所得醇溶物干燥，按血竭醇溶物∶泊洛沙姆∶聚乙二醇4 000（质量比为1∶2∶1），乙醇溶剂熔融法制备成固体分散体； 地奥心血康，成都地奥制药集团有限公司，批号060611； 复方丹参片，广州白云山和记黄埔中药有限公司（原广州白云山中药厂），批号1025； 盐酸肾上腺素注射液，北京市永康药业有限公司1 mL∶1 mg，批号05100241； I型胶原蛋白，Northington Biochemical Corporation公司，1 g分装，批号35E8048。
1.2 动物 昆明小鼠，SPF级，雄性，体质量18～22 g，购于广东省实验动物中心，合格证号A017。
1.3 仪器 上皿电子天平FA2104（上海精密科学仪器有限公司）；钻石牌机械秒表（上海星钻秒表有限公司）；电动玻璃匀浆机DY89-1型（宁波新之生物科技股份有限公司）。
1.4 药品、试剂的前处理与配制 血竭溶液：分别称取广西、云南、印尼、龙王、柬龙血竭固体分散体各10 g，再分别称取广西、印尼血竭固体分散体各5 g和2.5 g，共9份，分别加100 mL注射用0.9% NaCl研磨均匀，即得9种不同类型和剂量的血竭溶液。
复方丹参片溶液：复方丹参片3片加20 mL注射用0.9% NaCl研磨均匀，即得15 mg/mL丹参混悬液； 地奥心血康溶液：地奥心血康胶囊10粒加100 mL注射用0.9% NaCl研磨均匀，即得甾体总皂甙10 mg/mL地奥混悬液。
血小板聚集诱导剂溶液：精密称取Ⅰ型胶原0?1 mg，加入75 mL的生理盐水，用电动匀浆机冰浴下匀浆4 h，再静置冷藏2 d，临用前1 d，加入20 mL盐酸肾上腺素注射液，摇匀，定容到100 mL，冰箱4 ℃冷藏，避光保存备用。
2 方法
2.1 毛细管法测定血液凝聚时间（自改良） 昆明小鼠192只，♂，按体质量分类、随机分组，每组16只，分为NS组、阳性对照组（复方丹参片组0.3 g/kg、地奥心血康胶囊组0.2 g/kg）、不同产地龙血竭固体分散体组（广西血竭组分为0.5 g/kg、1?0 g/kg、2.0 g/kg低中高三组，印尼血竭组分为0?5 g/kg、1.0 g/kg、2.0 g/kg低中高三组，云南组2?0 g/kg，龙王血竭组2.0 g/kg，柬龙血竭组2.0 g/kg）;实验设计空白对照组给予0.9%氯化钠溶液，每天按体质量灌胃给药1次，连续给药7 d。
末次给药1.5 h后，在17 ℃的空调房间内，用毛细管插入小鼠眼底静脉丛取血，深约4～5 mm，轻轻转动，自血液流入管内按动秒表、开始计时，血液注满后取出毛细管平放于水平台面，每隔10 s向两侧倾斜一次，观察血液流动性，记录出现血液不再流动的时间［4］ 。
2.2 药物对胶原蛋白和肾上腺素诱导血瘀模型小鼠的保护作用［5］ 昆明小鼠240只，♂，按体质量分类，随机分组，每组20只，分组同2.1，每天按体质量给药，连续给药7 d。
末次给药1.5 h后，小鼠尾静脉注射胶原蛋白和肾上腺素的混合诱导剂，诱发动物血栓性偏瘫甚至死亡，记录注射后10 min内小鼠死亡数，计算恢复率以及存活时间。小鼠10 min内存活计为恢复，恢复率=每组恢复动物数/每组动物数×100% ［6，7］ ，存活时间≥10 min的，统一记录存活时间为10 min。
2.3 统计学处理 凝血时间数据以（±s）表示，用单因素方差分析（SAS统计软件，version 9.0），以P＜0.05为差异有显著性；每组动物恢复数进行χ2检验，组间差异采用两两组间χ2检验（SAS统计软件，version 9.0），以P＜0.05为差异有显著性；存活时间先进行F检验，检验方差齐性，再进行t检验。
3 结果
3.1 不同产地血竭制剂对小鼠凝血时间的影响 经单因素方差分析，各给药组与空白组比较差异均有显著性(P＜0.01)；给药组间进行比较，地奥心血康组、广西高剂量组、印尼中剂量组和高剂量组可较明显延长小鼠的凝血时间，印尼中剂量和高剂量组作用最强，此两组差异无显著性(P＞0.05)，其余给药组差异无显著性 (P＞0.05)。由实验结果可知，广西和印尼血竭的延长凝血时间作用似有浓度相关性，印尼1 g/kg组为有效浓度。复方丹参片，作为临床的常用活血化瘀药，延长凝血时间方面的作用并不很强。地奥心血康可较明显延长小鼠凝血时间，但与印尼组相比差异无显著性。见表1。
表1 不同产地血竭对正常昆明小鼠凝血时间的影响（略）
Tab.1 Effect of Dragon blood from different habitats on the clotting time of KM mice with capillary test
与空白对照组比较：*P＜0.01
3.2 不同产地血竭对血栓形成小鼠存活时间的影响 每组恢复动物数进行χ2检验，χ2=24.6257，P＜0.05，不同给药组对血栓形成小鼠存活率差异有显著性。 两两组间χ2检验，P＞0.05，提示广西与印尼血竭的效果似无浓度相关性，各浓度组组间差异无显著性；广西和印尼的高剂量组、云南组、龙王组、柬龙组4组组间对小鼠存活率的改善作用差异无显著性，相比较而言，广西和印尼的低剂量组、云南组同丹参组、地奥组有较好的提高小鼠存活率的作用，龙王和柬龙组对小鼠存活率的改善作用比丹参组、地奥组差，差异有显著性。
存活时间先进行F检验，组间方差齐性，给药组与空白组经t检验，给药组能明显提高小鼠的存活时间；给药各组对提高小鼠存活时间的作用差异无显著性 (P＞0.05)。结果见表2。
表2 不同产地血竭对血栓形成昆明小鼠存活时间的影响（略）
Tab.2 Effects of Dragon blood from different habitats on the living time of congestive mice induced with collagen protein and epinephrine hydrochloride
与空白对照组比较：*P＜0.01
4 讨论
毛细管测定凝血时间法是一种经典的血液、心血管作用药物有效性的初筛方法，具有操作简单、无设备性要求的优点［4］ 。本研究在此经典方法上稍作改进，以观察毛细管中血液流动性为凝血的观测指标，当发生流动性减慢时，毛细管中的某一区段可能先有凝血小栓形成，采用此法比原先的经典观察法——折断毛细血管观察血凝丝，可更有效地减少实验中的人为操作误差和环境误差，避免毛细管中某一小段区域先发生了凝血而在折断毛细管的`过程中未观察到，提高了实验数据的可靠性和均一性。
胶原和肾上腺素致血瘀模型是中医学上常用的致血小板聚集血栓栓塞模型，胶原可以激活血小板膜上磷脂酶A2，加速磷脂水解释放花生四烯酸，花生四烯酸在环氧酶以及进一步血栓烷A2合成酶的作用下转化为血栓素A2（TXA2），促进血小板聚集，肾上腺素兼有α受体和β受体的激动作用，其激动α受体可引起皮肤、黏膜、内脏血管收缩，其激动β受体可引起骨骼肌和心肌兴奋、心率加快等作用，故胶原和肾上腺素合用具有增强致血小板聚集的协同作用。
我国的血竭长期以来主要靠进口，国产血竭为血竭资源的开发利用开辟了前景。本实验研究表明：不同产地血竭可明显延长正常小鼠凝血时间，血液状态明显比正常组颜色更鲜红。国产血竭有与进口血竭近似的活血作用。对正常小鼠凝血时间的改变作用，不同产地血竭有差异，广西血竭与印尼血竭延长凝血时间(CT)的作用相对最强，这与胡海燕等人的报道不同［8］。对胶原与肾上腺素合用致血栓栓塞小鼠的保护作用，不同产地血竭没有差异，广西和云南血竭在保护血小板致聚剂诱导血栓形成小鼠的方面的作用相对比较强。且广西和印尼血竭作用效果似没有浓度相关性。广西和云南血竭作为国内主要的血竭资源，是否可以完全代替印尼血竭以及深入探讨血竭的活血作用机制，还需要进一步的实验研究。
篇5：促骨方对家兔实验性骨折愈合的影响及镇痛作用讨论论文
促骨方对家兔实验性骨折愈合的影响及镇痛作用讨论论文
软组织损伤，中医称为伤筋，是指人体骨骼周围的皮肤、皮下组织、肌肉、肌健、筋膜、韧带、腱鞘、关节囊等组织的损伤。受伤后，筋肉或损或断，经脉络脉随之受伤，气血互阻，血肿形成，引起疼痛、肿胀和功能障碍。四肢骨折的早期同样存在软组织损伤，瘀血阻滞是其主要的病理机制，故二者均表现为局部肿胀、疼痛、活动受限。促骨方具有活血散瘀、消肿止痛的功效，用于急性软组织损伤及骨折中、早期瘀血阻滞所致的肿胀、疼痛及肢体功效障碍。针对其功能主治，本研究对促骨方促进家兔桡骨骨折模型的愈合作用进行了药效学研究。
1 材料与仪器
1. 1 实验动物
普通级新西兰兔，体质量( 2 ±0. 2) kg，雌雄各半，由长沙市东创实验动物科技服务部提供，合格证号: 1696。SPF 级昆明小鼠，体质量( 20 ± 2) g，雌雄兼用，由长沙市东创实验动物科技服务部提供，合格证号: 20101694。
1. 2 药物与试剂促骨方，由湖南省中医药研究
院中药研究所制剂实验室提供，1 g 浸膏粉相当于4. 67 g 生药( 处方系湖南省中医药研究院李若存研究员的临床经验方: 由三七、丹参、积雪草、槐米组成) 。药材委托湖南省九旺医药有限公司定点采购，经湖南省中医药研究院李若存研究员鉴定，质量符合药典要求。制备工艺: 三七、丹参、槐米用75%乙醇加热回流提取2 次( 5 倍量，4倍量) ，每次提取1. 5 h，滤过，滤液减压回收乙醇，并浓缩至密度为1. 30 ～ 1. 35( 60 ℃) 的清膏，备用; 积雪草加水煎煮2 次( 12 倍水，10 倍水) ，每次1. 5 h，合并煎液，滤过，滤液浓缩至相对密度为1. 10 ～ 1. 15 ( 60 ℃) 的清膏，加乙醇使含醇量达65%，搅匀，静置24 h，滤过，滤液减压回收乙醇，并浓缩至相对密度为1. 30～ 1. 35( 60 ℃) 的清膏，与上述清膏合并，真空干燥( 真空度0. 08 ～ 0. 09 MPa，温度70 ～ 80 ℃) ，粉碎成细粉，临用时取浸膏粉，加适量蒸馏水配制成所需浓度的悬浊液，批号: 20101024。三七伤药胶囊，广西玉林制药有限责任公司，批号: 0328; 吲哚美辛片，山西太原药业有限公司，批号: 20100801; 硫化钠，上海统亚化工科技发展有限公司，批号: 071220;注射用青霉素，哈药集团制药总厂生产，批号:A101203106; 乌拉坦，国药集团化学试剂有限公司，批号: T20101026。
1. 3 主要仪器
BP1502 型电子天平，瑞士梅特勒-托利多公司; GJ-8402 型热板测定仪，浙江海宁白石电子医药仪器厂。
2 方法
2. 1 促骨方对家兔实验性骨折愈合的影响
2. 1. 1 动物分组、造模及给药: 取新西兰兔60 只，均静脉注射40%乌拉坦2. 5 mL /kg 麻醉后，动物右腿剪毛，用碘酒及酒精消毒，在无菌条件下手术，用骨锯造成家兔右前肢桡骨中段3 mm 完全缺损，术毕缝合伤口，给青霉素5 万单位/只肌注，连续3 d，以预防感染〔1，2〕。随机将家兔分成5 组，即模型组( 蒸馏水) 、三七伤药胶囊( 0. 63 g /kg) 阳性对照组及促骨方低( 1. 428 g /kg ) 、中( 4. 284 g /kg ) 、高( 8. 568 g /kg) 剂量组，每组12 只，灌胃给药，灌胃体积为5. 0 mL /kg，1 次/d，连续30 d。
2. 1. 2 局部皮肤肿胀程度检测: 各组动物于手术前及手术后第1、3、5、7 天用细丝线绕创口正中测量右肢周长作为肿胀程度。
2. 1. 3 X 光检查: 于手术后1、15、30 天，各组取动物拍摄双侧桡骨X 光片，拍摄条件为46 kV，100mA，28 mAs，60 cm。采用柴本甫，过邦辅方法评价，拟定四级骨折愈合标准: Ⅰ级: 骨缺损清晰存在，中间无骨组织影; Ⅱ级: 骨缺损两端有骨质增生影，缺损中间有云雾影样骨组织; Ⅲ级: 缺损中间有明显骨痂组织填充，但仍可见缺损印痕; Ⅳ级: 缺损处已完全被骨组织影填充，缺损印痕难以辨认。以上4 级分别计1、2、3、4 分，计算并比较各组动物的平均积分。
2. 1. 4 光镜组织病理学检查: 各组动物于手术后30 d 评定骨痂组织愈合程度: Ⅰ级: 骨痂部位以纤维性骨痂为主; Ⅱ级: 骨痂具有大量的软骨组织; Ⅲ级: 骨痂部位软骨或骨小梁各约占50%; Ⅳ级: 骨痂部位以交织的骨小梁为主。以上4 级分别计1、2、3、4 分，计算并比较各组动物的平均积分。
2. 2 小鼠热板试验选痛阈值在5 ～ 30 s 的雌性小鼠50 只，按体质量随机分为5 组，即对照组( 蒸馏水20 mL /kg) ，吲哚美辛( 0. 005 g /kg) 阳性对照组及促骨方低( 3. 98 g /kg ) 、中( 11. 94 g /kg ) 、高( 23. 88 g /kg) 剂量组，灌胃给药，体积为20 mL /kg，1次/d，连续7 d。末次给药后30、60、90 min 用热板测痛仪测小鼠痛阈值。
2. 3 小鼠扭体试验取小鼠50 只，按性别体质量随机分为5 组，即对照组( 蒸馏水20 mL /kg) ，吲哚美辛( 0. 005 g /kg) 阳性对照组及促骨方低( 3. 98 g /kg) 、中( 11. 94 g /kg) 、高( 23. 88 g /kg) 剂量组，灌胃给药，体积为20 mL /kg，1 次/d，连续7 d，末次给药后1 h，每鼠腹腔注射0. 6%醋酸0. 2 mL，秒表计时，记录20 min 内小鼠扭体潜伏期及扭体次数。
2. 4 统计学处理计量资料均采用珋x ± s 表示，组间比较采用方差分析，以P < 0. 05 为差异有统计学意义。
3 结果
3. 1 促骨方对家兔实验性骨折愈合的影响
3. 1. 1 促骨方对实验性骨折家兔局部软组织肿胀的'影响: 结果如表1 所示，与模型组比较，各给药组在给药后1、3、5 天对家兔骨折部位肿胀度显著低于模型组( P < 0. 05 或P < 0. 01) 。
3. 1. 2 促骨方对实验性骨折家兔损伤部位愈合的影响: 结果如表2 所示，治疗第15 天，促骨方中、高剂量组及三七伤药胶囊组X 光平均积分显著高于模型组( P < 0. 05 或P < 0. 01) ; 治疗第30 天，各给药组X 光平均积分均显著高于模型组( P < 0. 05 或P < 0. 01) 。
3. 1. 3 促骨方对实验性骨折家兔骨痂组织愈合的影响:与模型组比较，促骨方高剂量和阳性药对家兔骨折部位骨痂的形成和骨折的修复有明显的促进作用( P < 0. 01，P < 0. 05) 。而促骨方中、低剂量的作用不明显( P >0. 05) 。
3. 2 热板法检测促骨方对小鼠痛阈的影响结果如表4 所示，与对照组比较，促骨方中、高剂量组及吲哚美辛组小鼠痛阈在30、60、90 min 时显著升高( P < 0. 05 或P < 0. 01) 。
3. 3 促骨方对醋酸致小鼠扭体反应的影响结果如表5 所示，与对照组比较，各给药组小鼠潜伏期均显著延长( P < 0. 05 或P < 0. 01) ，扭体次数显著减少( P < 0. 05 或P < 0. 01) 。
4 讨论
中医认为，外来暴力猛烈撞击、重物挫压、不慎跌倒、强力扭转均可引起急性伤筋。受伤后，筋肉或损或断，经脉络脉随之受伤，气血互阻，血肿形成，引起疼痛、肿胀和功能障碍。四肢骨折的早期同样存在软组织损伤，瘀血阻滞是其主要的病理机制，故二者均表现为局部肿胀、疼痛、活动受限。治当以活血散瘀，消肿止痛，促进损伤组织愈合为法则。本实验结果表明，连续口服促骨方30 d，对实验性骨折家兔早期局部软组织肿胀有明显的消肿作用，X 光检查和病理检查证明，分别在15、30 d 均能促进家兔骨折部位骨痂的生长和愈合。还能提高热板法致痛小鼠的痛阈，延长醋酸致痛小鼠发生扭体反应的潜伏期及减少小鼠扭体次数，有明显的促进骨折愈合和镇痛作用，为促骨方临床应用提供了实验依据。
篇6：含蓝莓花色苷谷物发酵物抗辐射作用的实验讨论论文
含蓝莓花色苷谷物发酵物抗辐射作用的实验讨论论文
电离辐射直接作用于核酸、蛋白质(包括酶类)等生物大分子，使其发生电离、激发化学键的断裂等，继而造成其结构和性质的改变，最终导致细胞损伤，特别是DNA 的损伤 ;其也通过间接作用诱导产生超氧阴离子自由基、羟自由基等活性氧自由基，引起细胞内DNA 的氧化、断裂或碱基错配等现象，并最终诱发细胞死亡。因此，有关抗辐射的营养干预措施研究备受关注。含蓝莓花色苷的谷物发酵物( fermentedgrain-containing blueberry anthocyanins，蓝禾LH)采用复合酶发酵工艺，含有多种活性成分，如花色苷、锌及硒等，具有较强的抗氧化能力。本研究观察LH 的抗辐射作用，旨在为抗辐射功能食品研发提供实验依据。
1 对象与方法
1.1 动物分组与处理
清洁级昆明雄性小鼠50 只，6～7w 龄，体质量18～22g(军事医学科学院卫生学环境医学研究所动物中心。小鼠随机分为：正常对照(CN，灌胃蒸馏水17.5ml/kg bw，不辐照)、模型(M，灌胃蒸馏水17.5ml/kg bw+辐照)和低(L-LH 8.75ml/kg bw+辐照)、中(M-LH 17.5ml/kg bw+辐照)、高(H-LH35.08 ml/kg bw+辐照)剂量LH，共5 组，每组10 只。实验周期28d，每日灌胃1 次，每3 日测体质量1 次，期间动物自由摄食和饮水。D14，除CN 组外其余4 组小鼠接受4Gy、137Cs γ 射线全身照射一次， 吸收剂量率为0.775 ～ 0.760Gy/min。实验期结束，处死动物，测定各指标。
1.2 受试物LH
以蓝莓及黑米、江米、黍米等9 种谷物为原料，采用复合酶生物发酵工艺制成。LH 主要营养成分含量(/L)：能量4950kJ，蛋白质19.4g，碳水化合物170g，蓝莓花色苷400mg，谷氨酸792.54 mg、门冬氨酸218.35 mg、丙氨酸103.1 mg等17 种氨基酸共1.67g，镁140mg、钙10.7 mg、铁3.57 mg、锌3.15 mg、铜0.26mg、硒6.1 μg。
1.3 辐射源及其条件
137Cs γ 射线辐射源(中国医学科学院放射医学研究所)，辐射源距离50 cm，其剂量率为0.760 Gy/min。
1.4 观察指标
细胞计数：辐照前1d，辐照后D3、D14，分3 次检测，给药后30 min，尾静脉采血，用全自动血细胞分析仪(日本光电株式会社)测定白细胞数(WBC)，红细胞数(RBC)和血小板数(PLT)。脏器指数：末次给药前称重，给药后1h，颈椎脱臼处死，剥离脑、胸腺及脾脏，称体质量，计算脑指数、胸腺指数和脾脏指数。骨髓有核细胞计数：末次给药后1h,颈椎脱臼处死,分离股骨,用1ml 注射器共吸取5ml Hank’s 液, 冲出股骨中的全部骨髓细胞, 用全自动血细胞分析仪(日本光电株式会社)测定。血清MDA 含量、SOD 活性测定：末次给药后30min，摘眼球取血，按照试剂盒(南京建成生物工程研究所)说明书测定。
1.5 统计学分析
采用SPSS21.0 软件包，结果以x ±s 表示。CN、M 两组比较采用t检验，M 与LH 组之间比较采用单因素方差分析。
2 结 果
2.1 对137Csγ 射线照射
小鼠体质量的影响小鼠体质量呈增长趋势,且组间变化无统计学差异(P>0.05)。
2.2 对137Csγ射线照射
小鼠外周血象的影响。与CN 比，M 小鼠外周血WBC、PLT 数量明显降低(P<0.05)。照射后D3，M 及各LH 组小鼠外周血WBC 数量明显低于照射前1d(P<0.05)。与其他4 组比，照射后D14 ，H-LH 小鼠外周血WBC数量显著增高，且明显高于照射后D3(P<0.05);与其他4 组比，H-LH 小鼠外周血PLT 含量显著增高(P<0.05)。
2.3 对137Cs γ 射线照射
小鼠脏器指数的影响与CN 比，M 小鼠胸腺指数明显降低(P<0.05)。
3 讨 论
LH 可抑制小鼠胸腺指数的.明显降低，因其含有的微量元素锌可直接影响胸腺细胞的增殖。本实验结果显示，机体受到辐射作用后，会对造血系统产生影响，而LH 可通过增加辐射损伤小鼠骨髓有核细胞数、外周血白细胞数及血小板数量保护小鼠造血系统。LH 含有抗氧化活性成分，可降低小鼠MDA 含量，增强SOD 活性。其主要活性成分花色苷可自身氧化释放电子，直接清除自由基，发挥抗氧化作用;还可增加细胞内超氧化物歧化酶和谷胱甘肽转换酶活性，减轻氧化应激损伤。另外，LH中的矿物质锌、硒等是抗氧化酶的组成成分或激活剂，而硒还可直接清除自由基或与细胞膜结合构成膜结合硒，发挥抗氧化功能。综上所述，LH 可能通过增强免疫功能、提高抗氧化能力减缓小鼠辐射损伤。
文档为doc格式
