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昆明白小鼠胚胎干细胞分离与体外培养

时间:2022-05-19 20:38:20 其他范文 收藏本文 下载本文

【导语】以下是小编收集整理的昆明白小鼠胚胎干细胞分离与体外培养(共6篇),仅供参考,希望对大家有所帮助。

昆明白小鼠胚胎干细胞分离与体外培养

篇1:昆明白小鼠胚胎干细胞分离与体外培养

昆明白小鼠胚胎干细胞分离与体外培养

为探索昆明白小鼠胚胎干细胞建系方法,将受孕4.5天的`昆明白小鼠囊胚用免疫手术法去除滋胚层,然后将内细胞团(ICM)接种于胎鼠成纤维细胞饲养层上培养,形成的胚胎干细胞样集落用胰蛋白酶-EDTA消化法传代,培养后进行相差显微镜观察及碱性磷酸酶染色.结果饲养层上生长的ICM细胞呈典型的ES样细胞集落,传至第8代碱性磷酸酶染色呈强阳性.实验表明免疫手术法适用于昆明白小鼠ES细胞建系,获得的细胞集落具有ES细胞的主要生物学性状.

作 者:李煜 梁琳 王振飞 贾瑞贞 戴宝贞 李瑶 Yu Li Lin Liang Zhen-Fei Wang Rui-Zhen Jia Bao-Zhen Dai Yao Li  作者单位:内蒙古大学哺乳动物生殖生物学与生物技术教育部重点实验室,呼和浩特,010021 刊 名:细胞生物学杂志  ISTIC英文刊名:CHINESE JOURNAL OF CELL BIOLOGY 年,卷(期): 29(6) 分类号:Q2 关键词:小鼠   胚胎干细胞   免疫手术   内细胞团  

篇2:BRL-CM在昆白小鼠胚胎干细胞分离培养中的应用

BRL-CM在昆白小鼠胚胎干细胞分离培养中的应用

目的:探讨Buffalo大鼠肝细胞条件培养基(BRL-CM)在昆白小鼠胚胎干细胞(ES)分离培养中的应用.方法:用BRL-CM培养生长在STO(一种小鼠成纤维细胞)饲养层上的`昆白小鼠的桑椹胚和囊胚,然后由囊胚内细胞团(ICM)得到ES细胞集落,在有饲养层和无饲养层时用BRL-CM培养分离得到的ES集落.结果:桑椹胚在上述培养条件下能发育成囊胚,然后囊胚在饲养层上长出ICM;用0.1%Trypsin-0.016%EDTA离散ICM,接种到饲养层上培养得到ES集落,ES集落能维持早期传代.结论:在分离培养昆白小鼠的ES细胞时,BRL-CM结合STO饲养层可以用来培养桑椹胚和囊胚,桑椹胚可以发育为囊胚并孵出内细胞团;同时,这种培养条件也能维持昆白小鼠ES细胞的增殖和早期传代.

作 者:李三华 曹斌云 牟玉莲 张莉 冯书堂  作者单位:李三华(西北农林科技大学动物科技学院,陕西杨陵,712100;中国农业科学院畜牧研究所,北京,100094)

曹斌云(西北农林科技大学动物科技学院,陕西杨陵,712100)

牟玉莲,张莉,冯书堂(中国农业科学院畜牧研究所,北京,100094)

刊 名:安徽农业科学  ISTIC PKU英文刊名:JOURNAL OF ANHUI AGRICULTURAL SCIENCES 年,卷(期): 34(13) 分类号:Q599 Q952.6 关键词:大鼠肝细胞条件培养基   胚胎干细胞   STO细胞  

篇3:昆明白小鼠卵母细胞去核研究

昆明白小鼠卵母细胞去核研究

为了提高昆明白小鼠MⅡ期卵母细胞的去核效率及质量,该研究在不同条件下,比较了小鼠卵母细胞的去核效果:将小鼠MⅡ期卵母细胞放入含蔗糖浓度分别为0.01、0.02、0.03 g/mL的M2-液微滴中,在体式显微镜下观察显核效果以确定最佳浓度;将有清晰可见细胞核的卵母细胞放入含细胞松弛素B(Cytocha-lasin-B,CB)浓度分别为5、7.5、10 μg/mL操作液中去核,显微镜下确定去核率.结果表明: 操作液中加入蔗糖浓度为0.02 g/mL时显核效果最好; 去核时操作液中细胞松弛素B浓度为10 μg/mL时去核死亡率最低.

作 者:丛银峰 王勇胜 山灵 刘军 张涌 CONG Yin-feng WANG Yong-sheng SHAN Ling LIU Jun ZHANG Yong  作者单位:西北农林科技大学,生物工程研究所,陕西,杨凌,712100 刊 名:河北农业大学学报  ISTIC PKU英文刊名:JOURNAL OF AGRICULTURAL UNIVERSITY OF HEBEI 年,卷(期):2006 29(5) 分类号:Q813.3 关键词:昆明白小鼠   MⅡ期卵母细胞   蔗糖   细胞松弛素B   去核  

篇4:小鼠腹腔巨噬细胞的分离与培养

小鼠腹腔巨噬细胞的分离与培养

目的:建立一种小鼠腹腔巨噬细胞分离的简便方法,为低强度激光照射对巨噬细胞功能的影响研究提供实验细胞.方法:以无血清的RPMI-1640培养液灌洗小鼠腹腔,分离获取小鼠腹腔巨噬细胞,在含10%小牛血清的RPMI-1640培养液中培养.采用倒置显微镜观察细胞形态,台盼蓝染色计算存活率,瑞氏染色计算纯度.结果:获得高纯度的'巨噬细胞,具备巨噬细胞的形态特征.结论:本法是一种简便实用的分离小鼠腹腔巨噬细胞的方法.

作 者:李海涛 肖丹 屈学民 刘渊声 马长升 杨继庆 LI Hai-tao XIAO Dan QU Xue-min LI UYuan-sheng MA Chang-sheng YANG Ji-qing  作者单位:李海涛,屈学民,刘渊声,马长升,杨继庆,LI Hai-tao,QU Xue-min,LI UYuan-sheng,MA Chang-sheng,YANG Ji-qing(第四军医大学生物医学工程系,陕西,西安,710032)

肖丹,XIAO Dan(第四军医大学军事预防医学系,陕西,西安,710032)

刊 名:现代生物医学进展  ISTIC英文刊名:PROGRESS IN MODERN BIOMEDICINE 年,卷(期): 8(4) 分类号:Q813 关键词:小鼠   巨噬细胞   分离  

篇5:小鼠腹腔巨噬细胞的分离培养与鉴定

小鼠腹腔巨噬细胞的分离培养与鉴定

目的:建立一种简便的巨噬细胞分离与培养方法, 为骨替代材料降解产物的'研究提供巨噬细胞.方法:以无血清DMEM培养液灌洗小鼠腹腔,10 min后吸出灌洗液于含10%胎牛血清的DMEM培养液中培养.采用HE染色和倒置显微镜观察细胞形态;酸性磷酸酶及非特异性酯酶染色测定细胞内酶的表达;墨汁颗粒吞噬实验检测其吞噬功能.结果:获得高纯度的巨噬细胞,具有巨噬细胞的形态特征,良好的吞噬功能,含水解酶类.结论:本法是一种简易而实用的体外分离培养腹腔巨噬细胞的方法.

作 者:尹美珍 李世普 袁琳 戴红莲 YIN Meizhen LI Shipu YUAN Lin DAI Honglian  作者单位:武汉理工大学生物材料与工程研究中心,武汉,430070 刊 名:武汉大学学报(医学版)  ISTIC PKU英文刊名:MEDICAL JOURNAL OF WUHAN UNIVERSITY 年,卷(期): 27(2) 分类号:Q813.1+1 关键词:巨噬细胞   分离培养   鉴定   小鼠  

篇6:体外分离培养小鼠胃Cajal间质细胞的实验方法研究

体外分离培养小鼠胃Cajal间质细胞的实验方法研究

目的 对KM小鼠胃Cajal间质细胞进行体外分离、培养,并对其进行鉴定,摸索高效实用的方法,为进一步探索研究Cajal间质细胞的移植、替代治疗及药物实验提供基础.方法 以KM株小鼠胃为组织来源,体外分离、培养ICC,并进行细胞传代,光镜下观察其形态,用荧光标记C-Kit特异性抗体标记细胞,进行免疫组化鉴定.结果 细胞稳定贴壁后,形成梭形或三角形突起,3 d后可出现长突起,并可逐渐形成网络连接.结论 酶解法分离细胞成功,但纯度低,数量不足;体外培养ICC 24 h后逐渐稳定贴壁,3 d以后可形成网络连接,可稳定培养3周以上;传代后细胞正常形态逐渐发生变化,20 d后可逐渐凋亡.

作 者:柳利明 农晰婷 秦榕 路明亮 黄华  作者单位:昆明医学院第二附属医院消化内科,云南,昆明,650101 刊 名:昆明医学院学报  ISTIC英文刊名:JOURNAL OF KUNMING MEDICAL UNIVERSITY 年,卷(期):2010 31(3) 分类号:Q813.1+1 关键词:小鼠   胃   Cajal间质细胞  

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